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Information:  Durchfallerkrankungen werden großteils von enterotoxischen E. coli (ETEC) verursacht. Als ETEC- assozierte Virulenzfaktoren gelten hauptsächlich Enterotoxine und fimbrische Adhäsine. Fimbrintypen F4 (K88) und F18 werden häufig in isolierten E. coli aus abgesetzten Ferkeln gefunden. F18 findet sich meist in Shiga Toxin- produzierendem E. coli (STEC) und die Stx2e Variante wird mit Ödemen in Schweinen assoziert. Fimbrintypen F5 (K99), F6 (987P) und F41 werden mit E. coli induzierten neonatalen Durchfällen in Verbindung gebracht. Ein weiterer Virulenzfaktor ist EAST1, der in diversen pathogenen E. coli Stämmen detektiert wurde, in ETEC, enteropathogenen E. coli (EPEC) und STEC aus menschlichen und tierischen Isolaten.

Beschreibung:  BactoReal®  Typing E. coli enthält PCR Primer Sets für die Amplifikation und Detektion von porzinen E. coli Virulenz-assoziierten Genen. Die Methode basiert auf einem interkalierenden Farbstoff mittels real-time PCR. Amplifikations- und Gen-spezifische Schmelzkurve bei 515 nm indizieren die Amplifikation E. coli spezifischer Gene. Für das Screening auf porzine E. coli Adhäsin und Toxin Gene sollten einige bakterielle Kolonien pro Platte herangezogen werden. Reaction Mix und E. coli Positivkontrolle sind enthalten.

BactoReal® Typing Kit E. coli
Bestellnummer Reaktionen Kanal Erreger Kanal IPC Ziel
DVET001 200 SYBR Green F4, F5, F6, F18, F41, STa1, STb2, LT, Stx2e, EAST1, fimA, AIDA-I, pAA, escV, cnf1, iucD, papC, pic
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische Anwendungen geeignet.
Lieferung bei: -20 °C to +4 °C
Produkteigenschaften:
  • Genotypisierung porziner E. coli Virulenz-assozierte Gene
  • Real-time PCR und Schmelzkurvenanalyse mit mitgeliefertem Master mix

PCR Geräte: BactoReal®  Typing E. coli wurde für das Applied Biosystems® 7500 System (Thermo Fisher Scientific) entwickelt, ist aber auch für andere real-time PCR Geräte geeignet.

Frequently Asked Questions:

Das Kit ermöglicht die Typisierung von porcinen E. coli-Stämmen durch den Nachweis virulenzassoziierter Gene, darunter Fimbrien- und Toxin-Gene, mittels Real-Time PCR mit Schmelzkurvenanalyse.
Das Kit detektiert Fimbrien (F4, F5, F6, F18, F41, fimA, AIDA, pAA, escV) sowie Toxine (STa, STb, Stx2e, LT, EAST1), die typischerweise mit pathogenen E. coli bei Schweinen assoziiert sind.
Fimbrien ermöglichen die Anheftung der Bakterien an die Darmschleimhaut, während Enterotoxine und Shigatoxine zentrale Virulenzfaktoren sind, die Durchfall und Ödemkrankheit bei Schweinen verursachen.
Die Ergebnisse werden anhand von Amplifikationskurven und genspezifischen Schmelztemperaturen ausgewertet, wobei charakteristische Schmelzpunkte die einzelnen Virulenzgene unterscheiden.
Für die Typisierung wird DNA aus porcinen E. coli-Kolonien benötigt, die aus klinischen Proben wie Kot oder Darminhalt isoliert wurden.
BactoReal®, MycoReal®, ParoReal® and ViroReal® Kits laufen mit denselben thermischen, zyklischen Einstellungen.