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Information:  Das Rotavirus ist ein segmentiertes doppelsträngiges (ds) RNA Virus aus der Familie Reoviridae und wird in mindestens sieben Gruppen (A bis G) eingeordnet. Das Virus ist der ursächliche Erreger von schwerer Diarrhoe bei fast allen Säugetier Spezies (besonders Rind, Schwein, Hund, Katze, Pferd und Mensch) und Vögeln. Von Rotaviren wird angenommen, dass sie hauptsächlich Spezies-spezifisch sind, aber manche Übertragungen zwischen Spezies stattfinden können. Rotaviren der Gruppe A – C infizieren sowohl Menschen als auch Tiere, während Rotaviren der Gruppe D – G nur Tiere infizieren. Guppe A ist die häufigste und verursacht ungefähr 90 % der Infektionen bei Tieren und Menschen. Des Weiteren können Schweine auch sporadisch durch die Gruppe B, C und E infiziert werden. Rinder können sporadisch auch durch Gruppe B und C infiziert werden. Gruppe D, F und G kommen bei Vögeln vor.

Beschreibung:  ViroReal® Kit Rotavirus basiert auf der Amplifikation von RNA für den Nachweis von Rotavirus mittels RT real-time PCR. Unser sorgfältiges Design von Primern und Sonden gewährleistet höchste Sensitivität und Spezifität. Das Kit besteht aus einem Assay Mix für den Nachweis des Pathogens sowie einer Positivkontrolle und einem internen Positivkontrollsystem (IPC). Der mitgelieferte Reaktionsmix enthält dUTP und Uracil-N Glycosylase (UNG), um PCR carry-over Kontaminationen zu minimieren.

ViroReal® Kit Rotavirus
Bestellnummer Reaktionen Kanal Erreger Kanal IPC Ziel
DHUV02053 50 FAM Cy5 NSP4 gene
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische Anwendungen geeignet.
Lieferung bei: -20 °C dry ice
Produkteigenschaften:
  • Amplifikation und Nachweis von: NSP4 Gen von Rotavirus
  • Transkription mit thermostabiler MMLV Reverser Transcriptase (M-MLV)
  • beinhaltet RNase Inhibitor zur Hemmung von RNA Abbau
  • Real-time PCR mit rapid hot-start Taq DNA Polymerase
  • ROX™ Farbstoff als passive Referenz
  • Internes Positiv Kontrollsystem zum Ausschluss falsch-negativer Ergebnisse
  • Optimiert für den Umgang mit RT PCR-Inhibitoren
  • PCR-Geräte: läuft auf allen gängigen real-time PCR-Instrumenten
  • Harmonisierte Thermoprofile für gleichzeitige Analyse von DNA und RNA in einem Lauf
  • Erhältlich als: Kit (mit Reaktionsmix) oder Assay-only

PCR Geräte: ViroReal® Kit Rotavirus wurde für die Verwendung mit folgenden Geräten entwickelt: ABI® 7500 Fast Real-Time PCR System (fast cycle parameters werden nicht unterstützt, Thermo Fisher Scientific), Mx3005P® (Agilent), qTOWER3G (Analytik Jena), MIC instrument (bio molecular systems), LightCycler® 480 II (Roche) und cobas Z 480 Analyzer (Roche). Er eignet sich auch für andere real-time PCR-Geräte, die Fluoreszenz im FAM und Cy5 Kanal messen und differenzieren können (z.B. QuantStudio™ 5 / 6 / 7 (Thermo Fisher Scientific)).

Frequently Asked Questions:

Das Kit weist RNA des Nichtstrukturproteins 4 (NSP4) von Rotavirus A–C mittels One-Step-RT-PCR nach, mit Fluoreszenzdetektion im FAM-Kanal.
Rotaviren sind die häufigste Ursache schwerer Durchfallerkrankungen bei Säuglingen und Kleinkindern weltweit und können auch Tiere infizieren. Ein schneller Nachweis unterstützt die frühzeitige Diagnose und die Vermeidung von Ausbrüchen.
Validierte Probenarten sind RNA-Extrakte aus Stuhlproben, dem Standardmaterial für den Rotavirus-Nachweis.
Eine interne RNA-Positivkontrolle (IPC) wird während der Extraktion zugesetzt und im Cy5-Kanal detektiert. Sie überwacht die RNA-Extraktion und schließt PCR-Inhibitionen aus.
Die Nachweisgrenze (LoD95%) liegt bei 115 RNA-Kopien pro Reaktion. Die Validierung zeigte 100% Spezifität ohne Kreuzreaktionen sowie eine lineare Detektion zwischen 100 und 1.000.000 Kopien pro Reaktion.
BactoReal® , MycoReal® , ParoReal ® and ViroReal® Kits laufen mit denselben thermischen, zyklischen Einstellungen.