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Information:  Die Gattung Acanthamoeba findet sich in erster Linie als freilebende Protozoen in natürlichen Lebensräumen, kommt aber auch als Erreger von Krankheiten bei Mensch und Tier vor. Acanthamoeba dient als Wirt für eine Vielzahl von pathogenen Bakterien wie Mycobacterium avium. Ein Befall mit Acanthamoeba führt zu einer potenziell sehkraftbedrohenden Keratitis durch Kontaktlinsen, zu schweren Infektionen anderer Organe und zu einer tödlichen granulomatösen Amöbenenzephalitis. Es sind mehr als 20 Acanthamöbenarten bekannt, die sich in drei morphologische Gruppen (Gruppe I, II und III) und 22 Genotypen (T1-T22) einteilen lassen. Einige Arten (A. castellanii (T4), A. lugdunensis (T4), A. polyphaga (T4), A. rhysodes (T4), A. quina (T4), A. palestinensis (T2), A. griffinii (T3), A. lenticulata (T5), A. astronyxis (T7), A. culbertsoni (T10), A. hatchetti (T11), A. healyii (T12), A. byersi (T18) und A. divionensis) wurden kürzlich mit menschlichen Erkrankungen in Verbindung gebracht. Der Genotyp T4 gilt als der wichtigste Genotyp sowohl bei Infektionen des Auges als auch des ZNS. Der Literatur zufolge ist der Genotyp T4 der am häufigsten vorkommende Acanthamöben Genotyp, der weltweit Keratitis verursacht (ca. 86 %) (Diehl et al., 2021).

Beschreibung:  ParoReal® Kit Acanthamoeba T4 basiert auf der Amplifikation der DNA (18S rRNA Gen) von Acanthamoeba Arten des Genotyp T4 (A. castellani, A. lugdunensis, A. mauritaniensis, A. polyphaga, A. rhysodes, A. royreba) mittels real-time PCR. Der Test detektiert keine anderen Acanthamoeba Genotypen (T3, T15, T11, and T5), welche ebenfalls Keratitis verursachen. Geeignete Untersuchungsmaterialien sind DNA-Extrakte aus Proben von humanen klinischen Proben assoziiert mit Keratitis (Augenabstriche, Hornhautbiopsien, Augenpunktate, Hornhautscrapings) sowie von Kontaktlinsen und Kontaktlinsenflüssigkeit. Unser sorgfältiges Design von Primern und Sonden gewährleistet höchste Sensitivität und Spezifität. Das Kit besteht aus einem Assay Mix für den Nachweis des Pathogens sowie einer Positivkontrolle und einem internen Positivkontrollsystem (IPC). Der mitgelieferte Reaktionsmix enthält dUTP und Uracil-N Glycosylase (UNG), um PCR carry-over Kontaminationen zu minimieren.

ParoReal® Kit Acanthamoeba T4
Bestellnummer Reaktionen Kanal Erreger Kanal IPC Ziel
DHUP00153 50 FAM Cy5 18S rRNA
Für in-vitro Diagnostik geeignet.
Lieferung bei: +4 °C cool packs
Produkteigenschaften:
  • Amplifikation und Nachweis von: 18S rRNA Gen von Acanthamoeba Genotyp T4
  • Real-time PCR mit rapid hot-start Taq DNA Polymerase
  • ROX™ Farbstoff als passive Referenz
  • Internes Positiv Kontrollsystem zum Ausschluss falsch-negativer Ergebnisse
  • Optimiert für den Umgang mit PCR-Inhibitoren
  • PCR-Geräte: läuft auf allen gängigen real-time PCR-Instrumenten
  • Harmonisierte Thermoprofile für gleichzeitige Analyse von DNA und RNA in einem Lauf

PCR Geräte: ParoReal® Kit Acanthamoeba T4 wurde für die Verwendung mit folgenden Geräten entwickelt: ABI® 7500 Fast Real-time PCR System (fast cycle parameters werden nicht unterstützt, Thermo Fisher Scientific), Mx3005P® (Agilent), qTOWER3G (Analytik Jena), MIC instrument (bio molecular systems), LightCycler® 480 I (Roche), CFX Opus Real-time PCR System (Bio-Rad), CFX Dx (Bio-Rad) and T-COR 8 (Tetracore) und cobas Z 480 Analyzer (Roche). Er eignet sich auch für andere real-time PCR-Geräte, die Fluoreszenz im FAM und Cy5 Kanal messen und differenzieren können (z.B. QuantStudio™ 5 / 6 / 7 (Thermo Fisher Scientific)).

Frequently Asked Questions:

Das Kit detektiert spezifisch die DNA von Acanthamoeba-Spezies des Genotyps T4 durch Nachweis des 18S-rRNA-Gens. Der Genotyp T4 ist für etwa 86% der weltweit auftretenden Acanthamoeba-Keratitisfälle verantwortlich.
Der Genotyp T4 ist die häufigste Ursache der Acanthamoeba-Keratitis, einer das Sehvermögen bedrohenden Hornhautinfektion, die insbesondere mit Kontaktlinsentragen assoziiert ist. Ein frühzeitiger molekularer Nachweis unterstützt die rechtzeitige Therapie und die Vermeidung von Sehverlust.
Validierte Probenarten sind okuläre Abstriche, Hornhautbiopsien, okuläre Punktate, Hornhautabstriche, Kontaktlinsen und Kontaktlinsenlösung.
Eine interne Positivkontrolle (IPC) wird während der DNA-Extraktion zugesetzt. Sie wird im Cy5-Kanal detektiert und überwacht sowohl die Extraktionseffizienz als auch mögliche PCR-Inhibitionen.
Die Nachweisgrenze (LoD95%) beträgt 0,5 Genomkopien pro Reaktion und spiegelt die hohe Sensitivität des Tests für den Nachweis von Acanthamoeba T4 wider.
BactoReal® , MycoReal® , ParoReal ® and ViroReal® Kits laufen mit denselben thermischen, zyklischen Einstellungen.