Information:  Der Rhesusfaktor D (RhD), auch bezeichnet als RhD-Antigen, ist das häufigste der fünf wichtigsten Rhe-sus-Antigene (C, c, D, E und e) aus einer Vielzahl von Antigenen auf der Oberfläche von roten Blutkör-perchen. Das dominant vererbte RHD-Gen bestimmt, ob ein Mensch RhD-positiv oder -negativ ist. Der größte Teil der Bevölkerung ist RhD-positiv. Bei einem RhD-negativen Status liegt meist eine komplette Deletion des RHD-Gens vor. Seltener führen kleinere genetische Veränderungen (z. B. Punktmutationen, Insertionen, Deletionen und Gen-Rearrangements) zu einem nicht funktionalen oder schwachen RhD-Antigen. Die Vorhersage des RhD-Status des Fetus ist von großer Bedeutung für die Prävention der fetalen hämo-lytischen Erkrankung, bei der eine RhD-negative Mutter gegenüber einem RhD-positiven Fötus sensibili-siert wird, was eine mütterliche Immunantwort zur Bildung von IgG-Anti-D-Antikörpern auslöst, die den Fetus in einer nachfolgenden Schwangerschaft schädigen. Für die Analyse des fetalen RhD-Status ist eine ordnungsgemäße Extraktion der fetalen DNA essenziell. Die Bewertung der Extraktion von cffDNA kann sich als schwierig erweisen, da die mütterliche DNA das Signal der cffDNA überlagert. Durch einen anfänglichen, selektiven Restriktionsverdau und eine an-schließende PCR ermöglicht das FetoGnost® Kit Control die Bewertung der Extraktionsmethode durch Isolierung der fetalen DNA.

Beschreibung:  FetoGnost® ist ein nicht automatischer Real-Time-PCR-Test zum qualitativen Nachweis zell-freier fetaler DNA (cffDNA) in Plasmaproben von Schwangeren. Dieser Test ist für Frauen aller Altersgruppen ab der 12. Schwangerschaftswoche (SSW ≥ 11+0) mit Einling- oder Mehrlingsschwangerschaften geeignet. Der Test kann sowohl bei einer ersten Schwanger-schaft als auch bei Folgeschwangerschaften angewendet werden Der Test ist ausschließlich für Forschungszwecke bestimmt (For Research Use Only) und dient aus-schließlich der Validierung geeigneter Extraktionsmethoden für die Aufreinigung von cffDNA aus mütterli-chem Plasma. Der Test eignet sich somit für die Validierung der Extraktion von cffDNA aus humanem mütterlichem Plasma. FetoGnost® Kit Control kann mit FetoGnost® Kit RHD in einem PCR-Lauf verwendet werden.

  • Der Test eignet sich nicht für Proben, die vor SSW 11+0 abgenommen wurden.
  • Dieser Test ist ausschließlich für Forschungszwecke bestimmt und darf nicht für klinische Testungen verwendet werden.
Der Nachweis von cffDNA mit dem FetoGnost® Kit Control benötigt einen Restriktionsenzym-Verdau ei-nes Aliquots des Proben Eluats, um maternale DNA zu entfernen. Die verdaute DNA-Probe wird an-schließend mittels Real-Time-PCR untersucht. Sondenspezifische Amplifikationskurven in den Fluores-zenzkanälen für VIC, FAM und NED dienen dem Nachweis der Amplifikation von zwei fetalen Markern, wobei ein mütterlicher Marker als zusätzliche Kontrolle dient. Wenn Plasmaproben in Dreifachbestimmungen und Kontrollen in Doppelbestimmungen untersucht wer-den, reicht der Inhalt eines Kits für die Analyse von 15 Plasmaproben aus.

FetoGnost® Kit Control
Bestellnummer Reaktionen Kanal Erreger Kanal IPC Ziel
HUFG050 50 FAM, VIC, NED Maternal / Fetal Marker
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische Anwendungen geeignet.
Lieferung bei: -20 °C to +4 °C
Produkteigenschaften:
  • Amplifikation und Nachweis: 1 maternaler und 2 fetale DNA Marker
  • Real-time PCR mit rapid hot-start Taq DNA Polymerase
  • ROX™ Farbstoff als passive Referenz
  • Optimiert für den Umgang mit PCR Inhibitoren
  • PCR Geräte: Läuft auf allen gängigen real-time PCR Instrumenten mit NED-Kanal
  • Harmonisierte Thermoprofile für gleichzeitige Analyse mit FetoGnost® Kit RHD  

PCR Geräte: FetoGnost® Kit Control wurde für ABI® 7500 Instrument und QuantStudio™ 7 Pro (Thermo Fisher Scientific) entwi-ckelt - fast cycle Parameter werden von diesem Test nicht unterstützt. Der Test eignet sich aber auch für andere real-time PCR-Geräte, die Fluoreszenz im FAM-, VIC-, NED- und ROX-Kanal messen und diffe-renzieren können. Bei Verwendung von PCR-Plattformen, die nicht von Ingenetix getestet wurden, muss eine Evaluierung der Multiplex-PCR durchgeführt werden. Bitte beachten Sie, dass manche PCR-Plattformen vor der Verwendung einer Multiplex-PCR mit den jeweiligen Farbstoffen kalibriert werden müssen.

Frequently Asked Questions:

Das Kit dient dem qualitativen Nachweis von zellfreier fetaler DNA (cffDNA) in maternaler Plasma zur Validierung der DNA-Extraktion mittels Real-Time PCR.
Nachgewiesen werden zwei fetale Marker (FAM und NED) sowie ein maternaler Marker (VIC), der als Kontrolle für die Restriktionsverdauung dient.
Durch den Verdau werden maternale DNA-Fragmente entfernt. Nur fetale DNA bleibt amplifizierbar, was die Spezifität erhöht.
Die maternale Plasmaentnahme muss ab Schwangerschaftswoche 11+0 erfolgen. Für eine valide Analyse sind mindestens 1 ml Plasma erforderlich.
Die Nachweisgrenzen (LoD95%) liegen bei 15 Kopien/Reaktion (maternaler Marker), 20 (fetaler Marker 1) und 8 (fetaler Marker 2) mit hoher Linearität.
FetoGnost® Kits laufen mit denselben thermischen, zyklischen Einstellungen.